Validación del método de difusión en medio gelificado de almidón para la detección de alfa-amilasa en muestras forenses.

Resumen

Los estándares de calidad en la investigación forense requieren la validación de los métodos analíticos para establecer si cumplen con las expectativas para las que fueron desarrollados, más aún si se emplean en procesos judiciales. Por lo tanto, en el Laboratorio de Biología del Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses – Regional Bogotá, se validó el Método de Difusión en Medio Gelificado de Almidón que ha sido utilizado para evidenciar la presencia de fluidos biológicos de importancia forense, principalmente la saliva, partiendo de la medición de halos de hidrólisis generados por la actividad enzimática de la alfa-amilasa.

A partir de muestras de saliva y otros fluidos orgánicos como semen, sangre, flujo vaginal, materia fecal, sudor y lágrimas de veinte (20) individuos, se estandarizaron las condiciones óptimas de temperatura y tiempo de incubación para muestras de saliva, fluido de mayor interés en este estudio y se establecieron diferencias con los demás fluidos biológicos ante variables como la concentración y el tipo de soporte de las muestras. Los niveles de sensibilidad y especificidad fueron altos (100%) para alfa-amilasa pero bajos para alfa-amilasa tipo salival (79,2% y 12,5% respectivamente). Se obtuvieron diferencias significativas (a=0,05) en la actividad enzimática de muestras de saliva recogidas con diferentes soportes. Por lo tanto, este método puede ser utilizado como prueba de orientación para la búsqueda de fluidos orgánicos con presencia de alfa-amilasa, previo a análisis inmunológicos específicos para cada tipo de fluido y/o genéticos.